Twilight Sparkle：Tara Strong/Rainbow Dash：Ashleigh Ball/Apple Jack：Ashleigh Ball/Rarity：Tabitha St../

ひより：田中あいみ/わしも：松本梨香/まさお：朝井彩加/パパ：牛山茂/ママ：折笠愛/ナレーション：鈴木れい子/入れ歯くん：岡野浩介/おまわりさん：西村知道/おばあちゃん：金田アキ/ハジメ：安斎肇/../

粘稠男：伊藤悠翔////ニュルにゃん：渡部优衣///　　　　　　　/山口：山口立花子////ハナタソ：内田彩////ニュルりん：楠田亚衣奈/

未知

犬塚公平：中村悠一/饭田小鸟：早见沙织/犬冢䌷希：远藤璃菜/小鹿忍：户松遥/八木祐介：关智一/

花坂结衣：M・A・O/桃原奈月：村川梨衣/青岛萌香：三森すずこ/

未知

藤宫红叶：林原惠美/泽口小梅：三石琴乃/竹内凉子：折笠爱/草剃/护：井上和彦/国木田枫：弥生みつき/八重樫良树：上田佑司/山咲/樱：玉川纱己子/杉下俊一：难波圭一/ムラクモ（残云）：中田让治/

堀江由衣/小清水亚美/关智一/钉宫理惠/山口胜平/朴璐美/石冢运升/神田朱未/真殿光昭/田之中勇/大原沙耶香/花泽香菜/

未知

红细胞：花泽香菜/白细胞（中性粒细胞）：前野智昭/杀伤性T细胞u002F记忆T细胞：小野大辅/巨噬细胞：井上喜久子/血小板：长绳麻理亚/血小板（反帽子酱）：石见舞菜香/巨核细胞：甲斐田裕子/记忆细胞：中村悠一/B细胞：千叶翔也/肥大细胞：川澄绫子/NK细胞：行成桃姬/树突状细胞：冈本信彦/辅助T细胞：樱井孝宏/调节T细胞：早见沙织/一般细胞：小林裕介/乳酸菌（黑）：吉田有里/乳酸菌（红）：高桥李依/乳酸菌（熊猫）：藤原夏海/乳酸菌（斑）：久保由利香/癌细胞：石田彰/旁白：能登麻美子/

泽村荣纯：逢坂良太/御幸一也：櫻井孝宏/降谷晓：島﨑信長/小凑春市：花江夏樹/仓持洋一：浅沼晋太郎/